PCR - ein leistungsstarkes Werkzeug für vielfältige Anwendungen

Microsynth bietet einen umfassenden Arbeitsablauf, der bereits bei der Probenextraktion beginnt, um qualitativ hochwertige Daten zu erzeugen. Wenn Sie sich dafür entscheiden, Ihre PCR-Anwendung auszulagern, sparen Sie nicht nur Zeit und Aufwand, sondern profitieren auch von der technischen Expertise und den Einrichtungen zur Durchführung verschiedener PCR-basierter Experimente.

Digitale PCR vs. Real-time PCR vs. Endpunkt-PCR auf einen Blick:

	Digital PCR	Real-Time PCR	End-Point PCR
Übersicht	Die Überführung der Probe in tausende von Nanoliter-Endpunkt-PCR-Reaktionen ermöglicht die Bestimmung der absoluten Konzentration des Analyten.	Misst die Anreicherung des PCR-Amplifikationsprodukts, während es entsteht.	Misst die Menge des akkumulierten PCR-Produkts am Ende der PCR-Zyklen.
Quantitativ?	Ja, die Kompartimentierung des Analyten passt zu einer Poisson-Verteilung.	Ja, die Daten werden während der exponentiellen Wachstumsphase (log) der PCR erfasst, wenn die Menge des PCR-Produkts direkt proportional zur Ausgangsmenge des Analyten ist.	Nein, aber eine grobe Abschätzung der Menge des akkumulierten PCR-Produkts liefert "semi-quantitative" Ergebnisse.
Anwendungen	Absolute Quantifizierung der Viruslast Absolute Quantifizierung von DNA oder RNA Nachweis seltener Allele (Mutation oder SNPs in Flüssigbiopsien) Absolute Quantifizierung der Genexpression Genom-Edit-Detektion Kopienzahlvariation (z. B. Qualitätskontrolle von CAR-T und anderen adoptiven Zelltherapien) Umweltüberwachung Quantifizierung von DNA-Resten	Quantifizierung der Genexpression Microarray-Verifizierung Qualitätskontrolle und Assay-Validierung Pathogen-Nachweis MicroRNA-Analyse Virale Quantifizierung siRNA/RNAi-Experimente	Amplifikation von DNA für: Sequenzierung Genotypisierung Klonierung
Zusammenfassung	Die digitale PCR ist die Methode der Wahl, wenn: Referenzen oder Standards kaum verfügbar sind Sie eine robuste Quantifizierung benötigen (hohe Toleranz gegenüber PCR-Inhibitoren) Sie seltene Targets in komplexen Hintergründen quantifizieren wollen Sie kleine Fold-Änderungen detektieren wollen, wo die Real-Time PCR versagt	Real-time PCR ist die Methode der Wahl, wenn: Sie den Analyten in einem sehr breiten dynamischen Bereich bis zu 9 Logs messen Sie Konzentrationsänderungen des Analyten über das 2-fache erwarten Sie ein kostengünstiges Hochdurchsatz-Screening durchführen wollen	Die Endpunkt-PCR ist die Methode der Wahl, wenn: Sie eine genaue größenbasierte Unterscheidung benötigen Sie einen spezifischen Locus der DNA/RNA für eine genauere Analyse amplifizieren Sie das Vorhandensein des spezifischen Locus in Ihrer DNA/RNA bestätigen möchten