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Sequenzier-Primer
Im Hinblick auf die Verwendung von Standard- oder spezifischen Sequenzierprimern können wir Ihnen die folgenden fünf Optionen anbieten:
- Sie wählen und verwenden einen unserer Standard-Primer kostenlos (siehe Standard-Primer-Liste auf der rechten Seite).
- Sie schicken Ihren eigenen Primer (10 µM) in einem separaten Röhrchen zusammen mit Ihren Proben.
- Sie nutzen die Option "premixed" und geben den Primer selbst zur Probe (Endkonzentration des Primers: 4 µM).
- Sie bestellen einen spezifischen Sequenzierprimer. Folgen Sie einfach den Design-Richtlinien weiter unten und bestellen Sie den Primer zusammen mit Ihren Sequenzierreaktionen, indem Sie die Option "Jetzt bestellen" nutzen.
- Sie überlassen Microsynth das Primerdesign. In diesem Fall geben Sie bitte alle wesentlichen Informationen an und wir übernehmen das Design und die anschließende Synthese.
Leitfaden für das Primer-Design
- Primerlänge sollte etwa 18 Basen (+/-2) betragen
- G/C-Gehalt sollte ca. 50 % betragen
- Schmelztemperatur sollte um 48°C liegen
- Vermeiden Sie Hairpins, palindromische Sequenzen und Dimere
- Vermeiden Sie Primer, die zu 90 % mit einer zweiten Bindungsstelle assemblieren oder bei denen die letzten 7 Basen vom 3'-Ende des Primers perfekt mit einer anderen Stelle übereinstimmen
- Denken Sie daran, dass zwischen dem 3'-Ende des Primers und dem Beginn der Sequenz 30-60 Nukleotide verloren gehen. Berücksichtigen Sie dies bei der Wahl Ihrer Primerposition
Primer Lagerung
Ihre spezifischen Sequenzierprimer werden in unserem Sequenzierlabor für mindestens 4 Monate aufbewahrt (oder für 10 Monate, falls Sie sie zu Ihrer "Custom Primer List" hinzugefügt haben). Während dieser Zeit werden diese Primer oder Aliquots davon auf Anfrage an Sie verschickt.